【摘 要】
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目的 探讨泛素结合酶蛋白在脑胶质瘤细胞中的表达及与细胞周期的关系.方法 选取2015年1月至2016年12月间陕西省第四人民医院冻存的96例脑胶质瘤组织,采用免疫组化及蛋白印迹
【机 构】
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陕西省第四人民医院神经内科,西安,710043陕西省山阳县人民医院神经内科,商洛,726499;
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目的 探讨泛素结合酶蛋白在脑胶质瘤细胞中的表达及与细胞周期的关系.方法 选取2015年1月至2016年12月间陕西省第四人民医院冻存的96例脑胶质瘤组织,采用免疫组化及蛋白印迹法检测脑胶质瘤组织和脑胶质瘤细胞株U251细胞内细胞增殖标记物表达,分析脑胶质瘤细胞患者病理特征及预后与泛素集合酶UbcH10的关系;以血清饥饿释放试验分析U251细胞周期与UbcH10的关系;以siRNA干扰U251细胞中UbcH10表达情况,观察细胞周期进程、Rb磷酸化水平及细胞增殖能力变化情况.结果 脑胶质瘤组织中UbcH10表达量显著高于正常组织,差异有统计学意义(P＜0.05);细胞增殖标志物Ki-67表达量与UbcH表达量正相关(P＜0.05),UbcH表达量与组织学分级、肿瘤直径、肿瘤转移及浸润和预后相关(P＜0.05).经无血清饥饿72h后,细胞周期同步化,74.0％的细胞停止于G1期,血清释放推进细胞周期进程,6～8h后逐渐向S期和G2期转换;细胞饥饿72h后UbcH处于低表达状态,血清释放后其表达量逐渐升高,在9h时逐渐下降;siRNA干扰后,siRNA#3的抑制效果最强(P＜0.05);siRNA #3干扰后,Rb蛋白磷酸化水平降低(P＜0.05).采用siRNA干扰后,细胞阻滞在G1期,且差异存统计学意义(P＜0.05);shRNA干扰后U251细胞克隆形成数低于未处理组(P＜0.05).结论 在脑胶质瘤中UbcH10处于高表达状态,可通过下调Rb蛋白水平释放转录因子释放,调节下游靶基因表达及转录,促进细胞增殖,在脑胶质瘤的发生与发展过程中十分重要.
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