斑点杂交法检测TTV DNA

• 作 者: 陈汝光 黄呈辉 周育森 何忠平 王海涛
• 机 构: 深圳市宝安血站!广东深圳518101,深圳市宝安血站!广东深圳518101,军事医学科学院五所,北京地坛医院,军事医学科学院五所
• 出 处: 临床检验杂志
• 发表日期: 1999年06期
• 关键词: 斑点杂交法检测 TTV DNA 输血后肝炎 聚合酶链反应 献血员 戊型肝炎 地高辛标记 扩增产物 乙型肝炎 病毒基因

用ＴＴＶ基因组ＯＲＦ１区段的引物进行ＰＣＲ扩增， 扩增产物用地高辛标记的特异性探针进行斑点杂交检测。结果检测了５４３ 例肝炎病人和献血员血清标本中ＴＴＶＤＮＡ， 阳性检出率为１８．４％ （１００／５４３）， 其中甲型肝炎阳性率为６．０％ （２／３３），乙型肝炎为７．８％ （５／６４）， 丙型肝炎为２．３％ （１／４３）， 非甲－戊型肝炎为３９．６％ （４０／１０１）， 输血后肝炎为１２．５％ （５／４０），献血员为１７．９％ （４７／２６２）。对斑点杂交与套式ＰＣＲ方法进行了比较， 两种方法之间的符合率为９６．２％ 。

PCR amplification was performed with the primer of the ORF1 segment of the TTV genome, and the amplified product was detected by dot blot hybridization with a digoxigenin-labeled specific probe. Results The positive rate of TTVDNA in serum samples from 543 hepatitis patients and donors was 18.4% (100/543), of which the positive rate of hepatitis A was 6.0% (2/33), hepatitis B Was 7.8% (5/64), 2.3% (1/43) for hepatitis C, 39.6% (40/101) for non-E-hepatitis and 12.5% ​​for post-transfusion hepatitis (5/40), blood donors 17.9% (47/262). Dot blot hybridization and nested PCR methods were compared, the coincidence rate between the two methods was 96.2%.