【摘 要】
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目的:制备抗人心肌肌钙蛋白I(cTnI)单克隆抗体(cTnI McAb)并进行初步鉴定。方法:从健康意外死亡者的心肌中提取、纯化人cTnI,以其为抗原,免疫BALB/c小鼠后,取其脾淋巴细胞与小鼠Sp2/0
【机 构】
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广州军区第二门诊部内科,;第一军医大学珠江医院心血管内科;
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目的:制备抗人心肌肌钙蛋白I(cTnI)单克隆抗体(cTnI McAb)并进行初步鉴定。方法:从健康意外死亡者的心肌中提取、纯化人cTnI,以其为抗原,免疫BALB/c小鼠后,取其脾淋巴细胞与小鼠Sp2/0骨髓瘤细胞融合,反复筛选及克隆,得到能稳定分泌cTnI McAb的杂交瘤细胞株。初步鉴定cTnI McAb。结果:经间接ELlSA法筛选,3次克隆化后获得5株能稳定分泌cTnI McAb的杂交瘤细胞(3A7、3A11、3D2、3F10和1H9),5株单抗免疫球蛋白亚类鉴定均为IgG2a类。染色体数目92~110条。5株单克隆抗体腹水按1∶100稀释,与LDH、CK、CK-MB、AST和人心肌肌钙蛋白T(cTnT)行交叉反应为阴性。5株cTnI McAb 腹水效价为3.2×10-6~1.6×10-7。cTnI McAb 相加试验表明,3D2、3F10与3A7、3A11、1H9能识别不同的抗原表位。结论:本实验成功制备了具有较高活性的cTnI McAb,具有良好应用开发价值。
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