【摘 要】
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通过基因挖掘的方法从NCBI数据库中筛选得到一株嗜热的葡萄糖异构酶（GI）产生菌株Thermotoga petrophila RKU-1,化学合成该酶的基因并在大肠杆菌E.coli BL21（DE3）中进行可溶性表达
【机 构】
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浙江华康药业有限公司,浙江工业大学生物工程研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金(31401527);浙江省重大科技攻关项目(2013C02027)
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通过基因挖掘的方法从NCBI数据库中筛选得到一株嗜热的葡萄糖异构酶（GI）产生菌株Thermotoga petrophila RKU-1,化学合成该酶的基因并在大肠杆菌E.coli BL21（DE3）中进行可溶性表达。重组葡萄糖异构酶经过Ni-NTA柱亲和层析分离纯化后,对纯酶进行SDSPAGE检测,结果显示为单一条带,其分子量大小为50.8 k Da。测定了该重组酶对底物D-葡萄糖的活力为19.8 U/mg,并对其酶学性质进行了表征。该酶最适温度和p H分别为85℃和7.0,Co2＋对催化活力起着非常重
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