【摘 要】
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草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)隶属于呼肠孤病毒科,水生呼肠孤病毒属,该病毒引起草鱼鱼种出现严重的出血病.GCRV基因组由11个分节段的双链RNA构成,NS79是由草鱼
【机 构】
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河南师范大学水产学院,河南新乡,453007
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草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)隶属于呼肠孤病毒科,水生呼肠孤病毒属,该病毒引起草鱼鱼种出现严重的出血病.GCRV基因组由11个分节段的双链RNA构成,NS79是由草鱼呼肠孤病毒GCRV-HN14株S4节段编码的蛋白.根据草鱼呼肠孤病毒编码NS79的cDNA序列,经PCR扩增NS79基因部分片段,将目的基因片段插入原核表达载体pET-32a(+),构建重组表达质粒NS79E-pET-32a,转化到大肠杆菌BL21 (DE3)中,IPTG诱导表达,表达出来融合蛋白分子量约为35kDa,表达的重组蛋白用Ni-IDA-Sefinose(TM)树脂纯化后免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,采用ELISA法测定其效价大于1:64000.这些结果为NS79蛋白功能的深入研究提供基础.
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