BDNF转染神经干细胞可降低β-淀粉样蛋白对神经元的毒性

• 作 者: 陈宇新 杨璐军 张凤兰 钟慧霖 孙海涛 肖志成 姜晓丹
• 机 构: 510282广州，南方医科大学珠江医院神经外科，广东神经外科研究所，广东省脑功能修复与再生重点实验室,510282广州，南方医科大学珠江医院神经外科，广东神经外科研究所，广东省脑功能修复与再生重点实验
• 出 处: 中华神经医学杂志
• 发表日期: 2015年14期
• 关键词: β-淀粉样蛋白 tau蛋白 脑源性神经生长因子 神经干细胞

目的

探讨神经干细胞（NSCs）转染脑源性神经生长因子（BDNF）后对β-淀粉样蛋白（Aβ）毒性作用的抵抗能力及机制。

方法

用脂质体介导法将BDNF基因转染到C57小鼠NSCs内，经荧光显微镜及ELISA检测转基因NSCs及其分化细胞基因表达情况。体外培养小鼠神经元，将其分成3组：a组为神经元组，b组为神经元与NSCs共培养组，c组为神经元与BDNF转基因NSCs共培养组；每组设2平行组。培养3d后，向其中一平行组加入Aβ₄₀蛋白，作为d、e、f组。通过ELISA和Western blotting检验记录24 h和48 h后神经元生存率以及各组Aβ、总tau蛋白、磷酸化tau蛋白水平。

结果

BDNF转基因干细胞及其子代细胞均有BDNF表达并持续1.5周左右。以a组细胞存活率为参照，24 h后d~f组细胞平均存活率分别是51.86%±0.03%、73.68%±0.04%、85.34%±0.01%;48 h后d~f组细胞平均存活率分别是38.76%±0.01%、59.65%±0.04%、75.61%±0.07%；其中d、e组细胞存活率明显低于其他各组，差异有统计意义（P<0.05）。a~c组Aβ蛋白未能检测到，d~f组Aβ蛋白水平较高，组间差异不具有统计学意义（P>.05）。各组细胞总tau蛋白水平差异不具有统计学意义（P>0.05）。各组磷酸化tau蛋白水平差异有统计学意义（P<0.05），其中d、e组磷酸化tau蛋白水平显著高于其他各组，差异有统计学意义（P<0.05）。

结论

BDNF转基因NSCs可以持续表达BDNF基因产物，降低Aβ对神经元的毒性作用，同时通过减少细胞内磷酸化tau蛋白的水平提高细胞存活率。