【摘 要】
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为了给双肌肉牛品种的培育提供新的遗传素材,拟利用CRISPR-Cas9基因编辑技术制备牛MSTN基因编辑胚胎。从采集到的86对牛卵巢中收集卵母细胞进行成熟培养以及体外受精,并使用
【机 构】
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河南省农业科学院畜牧兽医研究所/河南省畜禽繁育与营养调控重点实验室,河南农业大学牧医工程学院,郑州外国语学校
【基金项目】
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国家肉牛牦牛产业技术体系项目(CARS-38),河南省肉牛产业技术体系项目(S2013-08),河南省农业科学院畜牧兽医研究所博士启动费项目(2016BSQD),河南省农业科学院自主创新专项(2018ZC57).
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为了给双肌肉牛品种的培育提供新的遗传素材,拟利用CRISPR-Cas9基因编辑技术制备牛MSTN基因编辑胚胎。从采集到的86对牛卵巢中收集卵母细胞进行成熟培养以及体外受精,并使用在线软件设计能够在体外高效编辑牛MSTN基因的gRNA序列,将验证后所得的体外切割活性最高的gRNA与Cas9mRNA的混合物显微注射牛的受精卵,培养至囊胚后,利用T7EI核酸内切酶法检测囊胚中MSTN基因的编辑情况,然后将基因编辑阳性的囊胚样品进行测序验证。结果表明,牛胚胎体外培养平均囊胚率为21.28%;在设计的多条gRNA序
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