【摘 要】
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目的:建立稳定的人脐静脉内皮细胞分离和培养的方法.方法:采用胰蛋白酶/胶原酶(1∶1)混合酶液消化法培养人脐静脉内皮细胞,简化完全培养液组分(不添加血管内皮细胞生长因子、
【基金项目】
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贵州省科学技术基金(2003-3015);遵义医学院硕士启动基金
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目的:建立稳定的人脐静脉内皮细胞分离和培养的方法.方法:采用胰蛋白酶/胶原酶(1∶1)混合酶液消化法培养人脐静脉内皮细胞,简化完全培养液组分(不添加血管内皮细胞生长因子、肝素等辅助因子),当原代培养细胞80%以上汇合后用胰蛋白酶消化传代;用形态学、免疫细胞化学法进行鉴定.结果:种植在培养瓶中的内皮细胞4h贴壁生长,48~96h生长最快,7~10d汇合.内皮细胞呈单层铺路石样外观,Ⅷ因子相关抗原(Ⅷ:Ag)和内皮细胞生长因子受体2(KDR)鉴定内皮细胞纯度达95%以上.结论:用混合酶液灌注脐静脉消化内皮细胞是获取内皮细胞的一种好方法,可靠性大,成功率高,可以构建体外研究血管内皮细胞的模型.
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