类风湿关节炎滑膜成纤维细胞通过高表达RANKL促进破骨细胞分化及活化

• 作 者: 郑东辉 戴冽 韦秀宁 朱浪静 莫颖倩 张白玉 邹
• 机 构: 中山大学孙逸仙纪念医院风湿免疫科
• 出 处: 中华关节外科杂志(电子版)
• 发表日期: 2011年05期
• 关键词: 关节炎 类风湿 滑膜 成纤维细胞 破骨细胞 核因子κB受体激活配体 骨保护素
• 基金项目: 国家自然科学基金面上项目(30972742);国家自然科学青年科学基金项目(81001334,30901333);广东省自然科学基金项目(9151008901000130,10451008901004542)

目的探讨类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RA-FLS)对破骨细胞(Oc)分化和活化的作用及机制。方法活动期RA滑膜体外分离培养FLS,以骨关节炎(OA)-FLS为对照,分别与健康人外周血单核细胞(MNC)共培养后,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色鉴定Oc并计数、甲苯胺蓝染色观察骨吸收陷窝情况。细胞免疫荧光染色检测FLS RANKL表达,Real-time PCR及W estern blot检测RANKL和OPG mRNA、蛋白表达。结果 RA-FLS与MNC共培养7 d时TRAP+且细胞核≥3个的Oc很少,14 d时见较多的Oc,21 d甲苯胺蓝染色示清晰的骨吸收陷窝,而OA-FLS与MNC共培养后未见Oc,也未见骨吸收陷窝。细胞免疫荧光染色示RA-FLS较OA-FLS高表达RANKL(P<0.05)。RA-FLS RANKL mRNA和蛋白表达较OA-FLS明显增高,而OPG mRNA和蛋白表达则明显降低,RANKL/OPG mRNA和蛋白比率较OA-FLS明显增高(均P<0.05)。结论 RA-FLS可能通过高表达RANKL,促进外周血MNC向Oc分化,并促进Oc的骨吸收功能。