人羧基肽酶 H不同区段抗原的克隆表达及其初步应用

• 作 者: 胡纪文 杨锡琴 宗克亮 郭兰芹 宋晓国 王国华 刘喜明 朱翠
• 机 构: 深圳市罗湖区中医院,军事医学科学院基础医学研究所,风帆集团职工医院,华北石油总医院,中国中医科学院广安门医院
• 出 处: 现代检验医学杂志
• 发表日期: 2004年期
• 关键词: 人羧基肽酶H 自身抗体 新诊断2型糖尿病 成人隐匿性自身免疫性糖尿病 human carboxypeptidase H autoantibody newly d

目的：构建人羧基肽酶 H 不同区段抗原的原核表达载体，诱导表达获得重组蛋白，初步验证人羧基肽酶 H 不同抗原区段在羧基肽酶 H 自身抗体检测中的应用价值。方法应用 RT-PCR 方法调取目的基因，构建相应的原核表达质粒，转化大肠埃希氏菌诱导表达重组蛋白，用重组蛋白作为包被抗原建立人羧基肽酶 H 自身抗体的间接 ELISA 方法，评价羧基肽酶 H 抗原在检测新诊断2型糖尿病患者抗羧基肽酶 H 自身抗体中的应用价值。结果获得了羧基肽酶 H 三种不同区段抗原，其中42～476氨基酸区段为较理想的抗原。以该全长抗原作为包被抗原检测95例新诊断2型糖尿病患者，羧基肽酶 H 自身抗体阳性率为8.42％。结论原核克隆表达的人羧基肽酶 H 42～476氨基酸区段抗原具有良好的抗原性，可作为成人隐匿性自身免疫性糖尿病鉴别诊断的候选抗原。