研究微小RNA-21（miR-21）对小鼠慢性病毒性心肌炎（CVMC）心肌纤维化的影响及其可能机制。
方法雄性4周龄Balb/c小鼠40只按照随机数字表法分为磷酸盐缓冲液（PBS）组、CVMC组、CVMC+miR-21抑制剂组和CVMC+同型对照组，每组各10只。首次注射柯萨奇B3病毒（CVB3）液或PBS定为第0天，研究总时间为42 d。CVMC组、CVMC+miR-21抑制剂组和CVMC+同型对照组的小鼠均于第0、14和28天经腹腔注射100TCID50的CVB3液0.1、0.15和0.2 ml/只，同时点PBS组小鼠注射相同剂量的PBS。CVMC+miR-21抑制剂组和CVMC+同型对照组小鼠在第14和28天注射病毒液后分别经尾静脉注射miR-21抑制剂0.1 ml/只或同型对照0.1 ml/只。42 d后行超声心动图检查评估小鼠心功能，然后无菌留取小鼠心脏，观察心肌绿色荧光蛋白（GFP）的表达，同时行苏木素伊红及Masson染色观察心肌病理学特征，并计算心肌病理积分（PS）及胶原容积积分（CVF），实时荧光定量逆转录聚合酶链反应测定小鼠心肌中miR-21、Ⅰ型胶原（COL1-A1）及Ⅲ型胶原（COL3-A1）mRNA的表达，Western blot法测定心肌中转化生长因子-β1（TGF-β1）和母亲DPP同源物7（Smad7）蛋白的表达。
结果（1）超声心动图检查结果：CVMC组和CVMC+同型对照组小鼠左心室收缩末期内径（LVESD）、左心室舒张末期内径（LVEDD）均明显高于PBS组（P均<0.05），左心室射血分数（LVEF）明显低于PBS组（P<0.05）。CVMC+miR-21抑制剂组小鼠LVESD、LVEDD均低于CVMC组和CVMC+同型对照组（P均<0.05），LVEF明显高于CVMC组和CVMC+同型对照组（P均<0.05）。（2）心肌病理学检测结果：CVMC+miR-21抑制剂组和CVMC+同型对照组小鼠心肌切片在荧光显微镜下可见GFP表达。CVMC组和CVMC+同型对照组小鼠心脏肿大僵硬，镜下可见心肌散在坏死灶，周围少量炎性细胞浸润，间质成纤维细胞增生明显，胶原纤维堆积。CVMC组和CVMC+同型对照组小鼠心肌PS分别为（1.14±0.69）和（1.00±0.63）分，CVF分别为（17.86±2.61）%和（16.78±2.58）%，均明显高于PBS组[PS为0分,CVF为（5.70±1.42）%，P均<0.05]。CVMC+miR-21抑制剂组小鼠心肌周围少量炎性细胞浸润，间质纤维化的程度较轻，CVF为（11.01±2.55）%，明显低于CVMC组和CVMC+同型对照组（P均<0.05），PS为（0.89±0.60）分，虽低于CVMC组和CVMC+同型对照组，但差异无统计学意义（P均>0.05）。（3）心肌组织miR-21、COL1-A1和COL3-A1 mRNA的表达量：CVMC组和CVMC+同型对照组小鼠心肌组织中miR-21、COL1-A1和COL3-A1 mRNA的表达量均明显高于PBS组（P均<0.05），而CVMC+miR-21抑制剂组小鼠心肌中上述因子的mRNA表达量则均明显低于CVMC组和CVMC+同型对照组（P均<0.05）。（4）心肌组织TGF-β1和Smad7蛋白的表达量：CVMC组和CVMC+同型对照组小鼠心肌中TGF-β1蛋白表达量均明显高于PBS组，而Smad7蛋白表达量则均明显低于PBS组（P均<0.05）。CVMC+miR-21抑制剂组小鼠心肌中TGF-β1蛋白表达量明显低于CVMC组和CVMC+同型对照组，而Smad7蛋白表达量则明显高于CVMC组和CVMC+同型对照组（P均<0.05）。
结论miR-21可促进CVMC小鼠心肌纤维化，这一作用可能是通过TGF-β1/Smad7信号通路介导的。