观察苦参碱和氧化苦参碱对肝癌细胞SMMC-7721增殖凋亡及酪氨酸激酶(JAK)-信号转导及转录激活因子(STAT)通路的影响。
方法应用苦参碱和氧化苦参碱干预肝癌细胞SMMC-7721,通过噻唑蓝(MTT)法检测对苦参碱和氧化苦参碱肝癌细胞增殖的影响,采用双荧光染色观察苦参碱和氧化苦参碱干预肝癌SMMC-7721细胞凋亡率的变化,并以反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测苦参碱和氧化苦参碱对肝癌SMMC-7721细胞STAT3、STAT5 mRNA的影响。
结果(1)随着苦参碱和氧化苦参碱药物浓度和作用时间增加,细胞增殖抑制率上升,苦参碱和氧化苦参碱作用各时间组的细胞增殖抑制率与作用浓度呈显著正相关(r=0.851~0.989),苦参碱和氧化苦参碱各浓度组不同作用时间比较细胞增殖抑制率差异有统计学意义。(2)在双荧光检测中,活细胞被吖啶橙(AO)染成绿色,凋亡细胞则被溴乙锭(EB)染成橘红色。苦参碱2.5 mg/ml作用48 h组凋亡率为52.1%,氧化苦参碱2.5 mg/ml作用48 h组凋亡率为29.6%,这说明相同浓度苦参碱比氧化苦参碱作用显著(χ2=9.100,P=0.003)。(3)不同浓度苦参碱和氧化苦参碱作用于肝癌SMMC-7721细胞后,STAT3、STAT5 mRNA表达量均明显下降,与用药前比较差异有统计学意义。STAT3、STAT5 mRNA在对照组细胞中的表达是0.76±0.06和0.72±0.04,在苦参碱1.0 mg/ml组的表达是0.50±0.04和0.43±0.03,在苦参碱2.5 mg/ml组的表达是0.25±0.03和0.22±0.04,在氧化苦参碱1.0 mg/ml组的表达是0.64±0.03和0.60±0.06,在氧化苦参碱2.5 mg/ml组的表达是0.49±0.06和0.41±0.06。相同浓度苦参碱和氧化苦参碱比较,苦参碱对肝癌SMMC-7721细胞STAT3、STAT5 mRNA的影响更显著,差异有统计学意义。
结论苦参碱和氧化苦参碱能显著抑制SMMC-7721细胞增殖、促进其凋亡,其机制可能与下调STAT3、STAT5的基因表达,抑制细胞信号转导通路有关。