【摘 要】
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为了获得小反刍兽疫病毒特异性抗原N蛋白,用于血清中抗小反刍兽疫病毒抗体检测方法的建立,根据Gen Bank中已发表的小反刍兽疫病毒（PPRV）N蛋白核苷酸序列,设计引物,扩增N基因。
【机 构】
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大连理工大学生命科学与技术学院,辽宁出入境检验检疫局,中国检验检疫科学研究院,四川出入境检验检疫局
【基金项目】
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“十二五”国家科技支撑计划“外来与新发动物疫病筛查与鉴定技术研究与示范”（2013BAD12B01）, 国家自然科学基金项目“NV蛋白介导HIRRV逃逸宿主RLRs抗病毒信号通路的分子机制”（41276174）
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为了获得小反刍兽疫病毒特异性抗原N蛋白,用于血清中抗小反刍兽疫病毒抗体检测方法的建立,根据Gen Bank中已发表的小反刍兽疫病毒（PPRV）N蛋白核苷酸序列,设计引物,扩增N基因。扩增片段通过NdeⅠ和HindⅢ酶切位点插入表达载体p ColdⅠ。重组蛋白通过p ColdⅠ载体转化,在大肠杆菌BL21（DE3）中实现了原核表达,经SDS-PAGE和Western Blotting检测表明,表达产物为58 k D的融合蛋白,可被PPRV感染动物血清识别,重组蛋白具有良好的反应原性。用纯化的重组N蛋白作为包
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