【摘 要】
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目的 基于Runx2在调节成骨分化中的重要作用,应用本实验室建立的Runx2转录活性上调剂筛选模型发现了阳性化合物T63.本实验旨在探究T63体外促进骨形成作用,为开发新型抗骨质疏松药物提供先导化合物.方法 通过检测模型细胞中荧光素酶表达活性的变化,测定其IC50,利用Western blot的方法检测MC3T3-E1细胞内Runx2蛋白水平变化,同时用p-NPP方法检测MC3T3-E1细胞内碱性
【机 构】
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中国医学科学院医药生物技术研究所生化研究室,北京 100050
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目的 基于Runx2在调节成骨分化中的重要作用,应用本实验室建立的Runx2转录活性上调剂筛选模型发现了阳性化合物T63.本实验旨在探究T63体外促进骨形成作用,为开发新型抗骨质疏松药物提供先导化合物.方法 通过检测模型细胞中荧光素酶表达活性的变化,测定其IC50,利用Western blot的方法检测MC3T3-E1细胞内Runx2蛋白水平变化,同时用p-NPP方法检测MC3T3-E1细胞内碱性磷酸酶的活性.结果 计算得到T63的IC50=0.36 μM.同时1～ 20 μM的T63作用48 h后,Runx2蛋白水平有所升高.相同浓度下,在成骨诱导液中作用6d、12 d、18 d后,碱性磷酸酶活性呈时间-剂量依赖性的上调,最高可达9倍左右.结论 全新的Runx2转录活性上调剂T63具有良好体外的促骨形成作用,是一种潜在抗骨质疏松候选化合物.
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