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目的
观察1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]对屋尘螨抗原(Dermatophagoides pteronyssinus, Der p)直接作用的P815肥大细胞Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)表达及白细胞介素-4(interleukin-4, IL-4)分泌的影响,探讨1,25(OH)2D3在肥大细胞免疫调节中的作用。
方法用不同浓度Der p、1,25(OH)2D3单独或联合激发P815细胞,收集激发细胞和上清。用real-time PCR及Western blot法检测P815细胞TLR4表达,ELISA法检测上清中IL-4浓度。
结果(1) P815细胞表达TLR4;不同浓度Der p均可上调P815细胞TLR4表达,且36 h组TLR4表达有明显浓度依赖性上调;(2) Der p可促进IL-4释放(P<0.05);(3)不同浓度1,25(OH)2D3单独激发对P815细胞TLR4表达及IL-4分泌均无明显影响(P>0.05);(4) 10-8 mol/L 1,25(OH)2D3可增强Der p对P815细胞TLR4表达的促进作用(P<0.01),1,25(OH)2D3可抑制Der p引起的IL-4的分泌(P<0.05或P<0.01),且1,25(OH)2D3浓度越高,抑制作用越强。
结论(1)尘螨抗原可通过上调肥大细胞TLR4表达,增加IL-4分泌,促进炎症及过敏反应的发生。(2) 1,25(OH)2D3对尘螨抗原引起的肥大细胞免疫应答的干预作用可能是通过抑制IL-4的合成和分泌,从而抑制Th2型免疫应答。