【摘 要】
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目的 建立实时定量PCR(real—time quantitative PCR,RQ-PCR)法检测急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)PML/RARa融合基因转录本,评价其在APL患者诊断和微小残留病(minimal residual disease,MRD)监测中的意义。方法设计TaqMan探针和引物,建立RQ-PCR法对长型(L-form)
【机 构】
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江苏大学附属人民医院实验血液学重点实验室,江苏省镇江市212002,江苏大学附属人民医院血液科,江苏省镇江市212002,江苏大学附属人民医院血液科,江苏省镇江市212002,江苏大学附属人民医院血液
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目的 建立实时定量PCR(real—time quantitative PCR,RQ-PCR)法检测急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)PML/RARa融合基因转录本,评价其在APL患者诊断和微小残留病(minimal residual disease,MRD)监测中的意义。方法设计TaqMan探针和引物,建立RQ-PCR法对长型(L-form)、短型(S-form)、变异型(V—form)不同类型PML/RARα阳性模板进行扩增,并检测6例APL患者PML/RARα融合基因转录本含量。结果RQ-PCR法最低可检测到10个拷贝/μE的阳性模板,但重复性较差,而10^8~10^2拷贝/αL阳模的重复性良好,正常对照无扩增信号。6例初诊APL患者不同类型PML/RARa融合基因转录本绝对含量为4.27×10^3~3.36×10^5拷贝/50ng(中位4.33×10^4拷贝/50ng),ABL纠正后的相对含量为29.38%~600.53%(中位48.12%)。1例患者诱导缓解后PML/RARa融合基因转录本下降,复发时又明显升高。结论RQ-PCR方法敏感、可靠,可用于APL患者的诊断和MRD监测。
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