重组腺病毒Ad-DDAH2转染大鼠脂肪干细胞的可行性

• 作 者: 李学峰 周世豪 王新花 庞益伟 王雁林 李清春 刁兴华 刘海
• 机 构: 滨州医学院附属医院生殖医学科,滨州医学院附属医院消化内科
• 出 处: 滨州医学院学报
• 发表日期: 2021年2期
• 关键词: DDAH2 脂肪干细胞 腺病毒 转染
• 基金项目: 滨州医学院科研计划(BY2016KJ04,BY2016KJ22)。

目的探讨腺病毒载体(Ad-DDAH2)转染大鼠脂肪干细胞(ADSCs)的可行性。方法构建Ad-DDAH2-GFP质粒。原代培养大鼠ADSCs,流式细胞术检测免疫表型CD29、CD45、CD90表达情况。以不同滴度的Ad-DDAH2-GFP转染ADSCs,用荧光显微镜计数转染效率及细胞形态。通过RT-PCR及Western Blot检测DDAH2在ADSCs中的表达情况。结果Ad-DDAH2-GFP重组腺病毒载体构建、包装成功,且病毒滴度达到2E+10PFU/ML。第4代ADSCs生长曲线呈现“S”形。细胞