不同方法抽提血清HBV DNA得率的比较

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目的:比较不同的HBV DNA抽提方法对PCR产物量的影响,方法:将HBV DNA阳性血清及投入了HBV DNA质粒的HBV DNA阴性血清,分别采用7种不同方法抽提核酸,抽提物作PCR后,产物行琼脂糖凝胶电泳,并对阳性扩增条带进行密度定量,结果:血清直接煮沸法,经典的蛋白酶裂解加酚/氯仿抽提法,蛋白酶裂解加酚/氯仿抽提法省缺乙醇沉淀和柱抽提法的HBV DNA抽提得率分别为75.2%,13.8%,21.9%,用碱变性裂解和蛋白酶裂解后煮沸所得上清液,以及血清直接作为模板,行PCR后不能得到阳性扩
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