【摘 要】
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目的 研究青天葵甲醇提取物(Nervilia fordii methanol extracts,NFME)体外对鼻咽癌CNE-2细胞的凋亡作用及其作用机制.方法 MTT法检测不同浓度(0,0.25,0.5,1,2,3 mg·mL-1)的NFME处理CNE-2细胞24,48 h对CNE-2细胞生长抑制率的影响;克隆原形成试验观察NFME对CNE-2细胞克隆形成率的影响;Hoechst凋亡染色观察NFME对CNE-2细胞凋亡的影响;Western blotting测定NFME作用下caspase-3、ERK1
【机 构】
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桂林医学院药学院,广西桂林541004;桂林医学院药学院,广西桂林541004;广西医科大学广西区域性高发肿瘤早期防治研究重点实验室,南宁530000
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目的 研究青天葵甲醇提取物(Nervilia fordii methanol extracts,NFME)体外对鼻咽癌CNE-2细胞的凋亡作用及其作用机制.方法 MTT法检测不同浓度(0,0.25,0.5,1,2,3 mg·mL-1)的NFME处理CNE-2细胞24,48 h对CNE-2细胞生长抑制率的影响;克隆原形成试验观察NFME对CNE-2细胞克隆形成率的影响;Hoechst凋亡染色观察NFME对CNE-2细胞凋亡的影响;Western blotting测定NFME作用下caspase-3、ERK1/2和c-Raf蛋白磷酸化水平的变化.结果 MTT试验结果显示,与对照组相比,在给药24h时0.5 mg·mL-1的NFME就能抑制CNE-2细胞的增殖(P＜0.05),抑制率为12.64％.而在给药48 h时0.25 mg·mL-1的NFME就能抑制CNE-2细胞增殖(P＜0.05),抑制率为22.43％;克隆原形成能力试验表明,0.25 mg·mL-1的NFME能够抑制CNE-2细胞集落的形成(P＜0.05);Hoechst33258凋亡染色观察到0.25 mg·mL-1的NFME作用24 h能够观察到CNE-2细胞发生凋亡(P＜0.05),凋亡率达到17.91％;Western blotting结果表明0.5 mg·mL-1的NFME能使CNE-2细胞中caspase-3发生剪切,随着给药浓度增加其剪切作用越明显(P＜0.01),同时0.5 mg·mL-1的NFME能够降低CNE-2细胞中ERK1/2和c-Raf蛋白的磷酸化水平(P＜0.05).结论 青天葵甲醇提取物能抑制鼻咽癌CNE-2细胞的增殖并诱导其发生凋亡,其作用机制可能与抑制ERK信号通路有关.
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