【摘 要】
：
【目的】利用大肠杆菌系统表达并纯化结核分枝杆菌MPT83蛋白,通过小鼠模型评价其免疫原性,建立血清学间接ELISA方法用于牛结核病临床检测,评价其应用潜能。【方法】构建p ET3
【机 构】
：
扬州大学,江苏省人兽共患病学重点实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,无锡市动物疫病预防控制中心,
论文部分内容阅读
【目的】利用大肠杆菌系统表达并纯化结核分枝杆菌MPT83蛋白,通过小鼠模型评价其免疫原性,建立血清学间接ELISA方法用于牛结核病临床检测,评价其应用潜能。【方法】构建p ET30a(+)-mpt83重组质粒,转化BL21(DE3)诱导表达并纯化,经细胞表面分子的流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)分析、ELISPOT试验等分析其在小鼠中的免疫原性,建立间接ELISA方法,检测临床奶牛血样,评价其用于牛结核病血清学检测的潜能。【结果】SDS-PAGE显示目的蛋白成功表达,Western blot证实其对兔抗H37Rv多抗血清具有良好免疫反应性;FCM结果显示其下调树突状细胞表面CD80分子的表达,上调小鼠脾脏CD4+和CD8+T细胞表面CD69的表达,ELISPOT结果表明其诱导的特异性IL-4分泌细胞数显著高于IFN-γ分泌细胞数,表现为Th2型免疫应答;建立了ELISA方法,检测临床奶牛血样200份,与牛结核外周血γ-干扰素体外释放试验结果的阳性符合率和阴性符合率分别为48.6%和90%。【结论】在大肠杆菌系统中高效可溶性表达MPT83蛋白,其在小鼠模型中主要呈现Th2型免疫应答,并以该蛋白为抗原建立了牛结核病血清学检测的间接ELISA方法。
其他文献
<正>第一部分:崛起——云南白药牙膏,4年,从3000万到10.8个亿!"云南白药是一个具有百年历史的老字号企业,对这样一个有着深厚文化底蕴的企业而言,传承是相对容易的,而创新,则
清朝首任伊犁将军明瑞政绩述评阿拉腾奥其尔边臣疆吏及其政绩是边疆史地研究的重要内容。清朝首任伊犁将军明瑞即是边臣疆吏之一。明瑞（？～１７６９年），富察氏，满洲镶黄旗人，一等承恩公富文之
目的:观察自拟除颤汤治疗阵发性心房颤动的临床疗效。方法:将106例阵发性房颤患者随机分成,治疗组54例、对照组52例。2组患者均接受常规治疗,治疗组在此基础上加用除颤汤。结
报告1例艾滋病合并舌尖尖锐湿疣,患者发现舌尖赘生物15天。予以在局部麻醉下行舌尖尖锐湿疣电凝电切术。术后予以口服抗生素预防感染、每日口腔中药保留漱口等治疗,治疗效果
射流器广泛用于选矿、石油、食品等行业。抽吸压强是射流器的主要性能指标。影响其抽吸压强的主要因素有面积比、喉管长度、喉嘴形状,喉嘴距以及射流角度等。其中面积比、喉
目的对醋酸地塞米松搽剂质量控制与临疗效进行分析。方法选本中心门诊部收治的46例神经性皮炎患者,作为研究对象,采用醋酸地塞米松为主药制备搽剂对患者进行治疗,并用可见分
文章以2007-2016年收录在CNKI数据库中有关节事旅游的文献为研究对象,运用文献计量法对文献的外部形式特征进行统计分析,并分析文献在时间和学科上的分布规律;运用共词分析法
目的探讨人工全髋关节置换术后康复指导的临床效果。方法将我院2011年3月至2012年12月的73例人工髋关节置换术治疗患者作为研究对象,随机分为常规护理的对照组和康复指导的观
分析了１９８３～１９９２年我院确诊的感染性心内膜炎（ＩＥ）６６例，并与１９４８～１９６３年北京地区确诊的ＩＥ患者３２０例进行了系统的比较。结果表明：近１０年来，①ＩＥ的基础心脏病中，风湿性心瓣膜病所占比例较过去明显减少；而先天性心脏病增