胃贲门腺癌组织PTPN12表达生物学意义研究

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目的 探讨非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶12(PTPN12)在胃贲门腺癌(GCA)的表达以及对胃癌细胞体外增殖、迁移和侵袭等生物学特性的影响.方法 分别采用RT-qPCR和SP免疫组织化学法检测67例GCA组织及其相应癌旁正常组织中PTPN12 mRNA和蛋白的表达情况,分析其与患者临床病理特征的关系;分别采用RT-qPCR和蛋白质印迹法方法检测PTPN12在胃癌细胞中mRNA和蛋白的表达;构建pcDNA3.1-PTPN12过表达质粒并转染BGC823细胞,检测其转染效率,并应用MTS法、克隆形成实验、划痕实验、Transwell小室分别检测转染前后细胞增殖、迁移和侵袭的变化.结果 在GCA组织中,PTPN12 mRNA的相对表达量显著低于其相应癌旁正常组织,Z=-10.359,P<0.01;与淋巴结转移(Z=-2.704,P=0.007)和TNM分期(Z=-3.699,P<0.01)相关.在GCA组织中,PTPN12蛋白阳性表达率与相应癌旁正常组织阳性表达率分别为32.84%(22/67)和79.10%(53/67),差异有统计学意义,χ2=29.101,P<0.01;并且与淋巴结转移(χ2=5.298,P=0.021)和TNM分期(χ2=5.761,P=0.016)相关;在胃癌细胞中PTPN12 mRNA和蛋白表达均低于对照组,F=862.733,P<0.01.在BGC823细胞中转染PTPN12过表达质粒,BGC823未转染组、pcDNA3.1-NC组和pcDNA3.1-PTPN12组PTPN12 mRNA相对表达量分别为1.279±0.258、1.100±0.052和20.442±0.619,F=2457.892,P<0.01.BGC823未转染组与pcDNA3.1-NC组差异无统计学意义,t=1.178,P=0.304.转染后0、24、48、72和96 h,BGC823未转染组细胞增殖速度分别为0.237±0.005、0.306±0.017、0.551±0.016、0.877±0.075和1.014±0.039,pcDNA3.1-NC组增殖速度分别为0.227±0.010、0.310±0.010、0.508±0.045、0.886±0.025和0.923±0.050,pcDNA3.1-PTPN12组增殖速度分别为0.232±0.010、0.261±0.010、0.395±0.025、0.676±0.035和0.678±0.038.在BGC823细胞中过表达PTPN12,与对照组相比,在72 h其增殖能力显著减弱,F72 h=22.668,P<0.01;96 h其增殖能力显著减弱(F96 h=66.812,P<0.01),克隆形成率显著减少(F=1484.140,P<0.01),抑制其侵袭能力(F=234.999,P<0.01).结论 PTPN12在GCA组织中低表达,并与胃贲门腺癌的发生发展密切相关,PTPN12过表达可抑制胃癌细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力.
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