慢病毒介导炭疽毒素受体1基因靶向沉默对γ珠蛋白基因表达的影响

• 作 者: 徐琴 李贵芳 金婷婷 李頔 熊永红 安邦权 黄盛
• 机 构: 贵州省人民医院检验科,铜仁市人民医院肿瘤科,贵州大学医学院
• 出 处: 发育医学电子杂志
• 发表日期: 2018年4期
• 关键词: β-地中海贫血 炭疽毒素受体1 慢病毒载体 γ珠蛋白
• 基金项目: 国家自然科学基金(81660023);贵州省科技厅项目(黔科合平台人才(2016)5670号);贵阳市科技创新平台计划([20161001]35号)

目的 探讨沉默炭疽毒素受体1（anthrax toxin receptor 1,ANTXR1）基因对γ 珠蛋白基因表达的影响. 方法构建ANTXR1 基因特异性序列的shRNA 重组质粒及阴性对照重组质粒,经酶切验证及测序鉴定后,将干扰载体和慢病毒质粒共转染入293T 细胞后收集病毒上清液,再将其转染至K562细胞中,并经puromycin 筛选稳转细胞株.通过实时荧光定量PCR 技术检测各组ANTXR1 基因和γ珠蛋白基因mRNA 的表达情况;通过Western 蛋白印迹技术检测各组ANTXR1 蛋白和