银杏小孢子叶球蛋白提取和双向电泳体系优化(Ⅱ)

来源 :东北林业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:woshcn
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以银杏小孢子叶球为材料,比较了不同的提取的方法、蛋白质裂解液组成、pH值范围以及不同质量浓度SDS—PAGE凝胶对双向电泳的影响。结果表明:TCA/丙酮/酚法比TCA/丙酮法更适合于银杏小孢子叶球蛋白的提取;含有硫脲的蛋白质裂解液Ⅱ,可显著提高蛋白质的溶解性,在2-DE图谱上可分辨出748个蛋白质点,比用蛋白质裂解液Ⅰ提取的蛋白点数多620个。采用pH3—10的胶条分离时,蛋白点集中在pH=4~8,使用pH=4—7的胶条,图谱胶点重叠少,也较清晰,更利于低丰度蛋白的检出。用TCA/丙酮/酚提取蛋白,并以蛋
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