【摘 要】
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目的探讨肿瘤细胞B16F10通过自分泌对抗由L-抗坏血酸钠（VitCNa）介导的凋亡作用。方法常规在75 cm~2培养瓶中培养小鼠黑色素瘤细胞B16F10,待细胞长至90%～95%融合时吸取原DMEM/高
【机 构】
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广东省妇幼保健院生殖健康与不孕症科,中山大学中山医学院干细胞与组织工程中心,中山大学药学院
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目的探讨肿瘤细胞B16F10通过自分泌对抗由L-抗坏血酸钠（VitCNa）介导的凋亡作用。方法常规在75 cm~2培养瓶中培养小鼠黑色素瘤细胞B16F10,待细胞长至90%～95%融合时吸取原DMEM/高糖培养液,用PBS反复清洗后加入无血清的DMEM/高糖10ml在培养箱中培养6～8 h,收集培养液用2500 r/min离心5min后上清用0.22μm滤器过滤,-20℃保存备用,在6孔板中每孔接种1×10^6 B16F10,常规培养24h后,实验组每孔加入2ml条件培养液（含有10%胎牛血清）
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