表达红色荧光蛋白DsRed报告基因的逆转录病毒载体的构建和在肝干细胞体内示踪中的应用

• 作 者: 李文林 苏娟 陶欣荣 Joseph T Lau 胡以
• 机 构: 第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室,TheDepartmentofMolecularandCellularBiology
• 出 处: 第二军医大学学报
• 发表日期: 2005年3期
• 关键词: 红色荧光蛋白 基因.报告 逆转录病毒载体 肝干细胞 red fluorescence protein gene reporter retroviral ve
• 基金项目: 国家自然科学基金，上海市科委资助项目

目的:建立表达红色荧光蛋白DsRed的逆转录病毒载体,并对肝原始细胞进行体外标记和体内示踪研究.方法:将pDsRedl 1载体中的DsRed片段克隆到逆转录病毒载体pLNCG C1中构建了pLNCG DsRed载体.将该载体导入Phoenix包装细胞,进而采用乒乓转染的方法感染包装细胞PT67,获得高滴度稳定产毒的PT67细胞系.结果:利用PT67细胞系产生的病毒上清可以高效的感染体外培养的肝原始细胞系.将这些DsRed标记的肝原始细胞移植到小鼠损伤肝脏中,4周后可以在再生肝脏中清晰地观察到具有红色荧光的