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为了构建一个利用小鼠乳清酸蛋白（mWAP）基因座完整的上下游调控序列指导人乳铁蛋白（hLF）基因组序列在乳腺特异性高效表达的mWAP-hLF杂合基因座，我们采用了连续三步‘Gap—repair’的方法。首先。以pBR322载体作为骨架，插入预先无痕连接在一起的6个同源臂，构成能连续进行三次gap—repair的基因抓捕载体。然后在大肠杆菌内利用Red同源重组系统介导的gap—repair技术，第一步从含mWAP基因座的细菌人工染色体（mWAP BAC）上亚克隆了8kb的mWAP基因3’端完整侧翼序列到抓捕