【摘 要】
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目的:分析儿童外周血干扰素基因刺激因子(stimulator of interferon genes,STING)启动子-436～+267区域序列变化.方法:采用PCR产物直接测序的方法,对48例儿童的STING基因启动子
【机 构】
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南京医科大学附属南京医院(南京市第一医院)儿科,江苏南京,210006
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目的:分析儿童外周血干扰素基因刺激因子(stimulator of interferon genes,STING)启动子-436～+267区域序列变化.方法:采用PCR产物直接测序的方法,对48例儿童的STING基因启动子区进行序列分析,构建重组报告质粒pGL-3/STING (TT)和pGL-3/STING(CC),转染人类胚胎肾(human embryonic kidney,HEK)293T细胞,检测其荧光素酶活性,计算相对活性单位(the relative luciferase activity unit,RLU).结果:发现STING基因启动子区的1个新的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点(-401)T/C;该位点TT、TC、CC这3种基因型的频率分布分别为45.8％、37.5％、16.7％;经酶切、测序鉴定,成功构建了含有该位点的STING启动子序列(-436～+267)的表达质粒pGL-3/STING(TT)和pGL-3/STING(CC).与pGL-3/STING(TT)质粒比较,pGL-3/STING (CC)启动子的RLU明显降低.结论:STING基因(-401)T/C是一个新的SNP,该SNP可降低STING基因启动子的活性,进而可能影响基因的转录调控,影响机体对疾病的易感性.
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