基于常规引物靶向结核分枝杆菌Ⅱ型分枝杆菌散在重复单位的恒温扩增

• 作 者: 吴康 屈蓉 王刚 薛清华 吕建新 Douglas BLowr
• 机 构: 上海市（复旦大学附属）公共卫生临床中心,温州医科大学检验医学院和生命科学学院
• 出 处: 复旦学报:医学版
• 发表日期: 2020年6期
• 关键词: 恒温扩增 重复DNA 结核分枝杆菌 Ⅱ型分枝杆菌散在重复单位 isothermal amplificationrepetitive DNAMycobacteri
• 基金项目: 国家重点研发计划(2018YFD0500900),国家科技重大专项(2018ZX10731301,2018ZX10302301),上海市科委医学引导项目(18411970700)

目的探讨基于特异常规引物(即引物不需折叠成特定二级结构)靶向恒温扩增重复DNA序列的方法,并测试其检测结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)的可能性。方法以合成的重复DNA或以抽提的细菌基因组DNA为模板,用Bst 2.0 WarmStart DNA聚合酶进行恒温扩增。用琼脂糖凝胶电泳检测扩增结果。结果合成的重复DNA可用其特异常规引物进行恒温扩增。进一步,Mtb H37Rv Ⅱ型分枝杆菌散在重复单位(mycobacterial interspersed repeti