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[目的]定向诱导大鼠脂肪间充质干细胞分化为髓核样细胞,为椎间盘退变性疾病的细胞移植治疗奠定生物学基础。[方法](1)200gSD雄性大鼠断颈处死后,取腹股沟脂肪垫处脂肪,0.1%胶原酶消化,体外接种培养,同时采用极限稀释法纯化细胞;(2)利用流式细胞技术对细胞表面标记进行鉴定;(3)第3代细胞消化计数后,用1.2%海藻酸钠溶液悬浮,调整细胞密度至1×10^6/ml,滴入3.5%CaCl2溶液形成微球,加入含TGF—betal的诱导培养基,低氧条件下进行微球联合培养;(4)7d后,取部分微球进行A