检测犬瘟热病毒抗体的重组N蛋白-ELISA方法的建立及应用

• 作 者: 简中友 JIA Yun 王全凯 XU Li-qiu 胡传伟 LI Ye LI Zhen-rong
• 机 构: 吉林农业大学,动物科技学院,吉林,长春,130062辽宁出入境检验检疫局,辽宁,大连,116001;吉林农业大学,动物科技学院,吉林,长春,130062;辽宁出入境检验检疫局,辽宁,大连,116001
• 出 处: 中国预防兽医学报
• 发表日期: 2008年8期
• 关键词: 重组质粒 重组N蛋白 间接ELISA

将已构建成功的重组质粒pET-N转化入Rosetta 2(DE3)菌株中,在IPTG诱导下获得重组N蛋白.用镍离子亲和层析方法对表达产物进行纯化,对纯化效果及纯化产物的特异性进行SDS-PAGE电泳及Westernblot检测.以纯化的重组N蛋白作为包被抗原,对各种反应条件进行了优化,建立了检测CDV抗体的间接ELISA方法.用此方法检测了270份血清样品,并与法国Synbiotics公司ELISA试剂盒检测结果相比较,符合率达92.4%.为应用血清学方法对犬科动物进行犬瘟热流行病学的调查奠定了基础.