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利用小鼠锌指蛋白ZF-12基因组DNA片段,构建了针对小鼠ZF-12基因座的替换型打靶载体pSSC-TV-10.5.经限制性核酸内切酶酶切及部分测序鉴定其结构正确后,通过电穿孔将线性化打靶载体导入ES细胞内,经G418/GANC双药筛选和分子鉴定,获得4个ZF-12+/-基因的ES细胞杂合子克隆,其生长状态良好,为进一步建立ZF-12基因剔除的小鼠动物模型创造了条件.