组织型纤溶酶原激活剂cDNA表达质粒的构建及其在CHO细胞中的表达

• 作 者: 张瑜虹 黄培堂 徐秀英 李丰生
• 机 构: 军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院生物工程研究所北京100071,北京100071,北京100071
• 出 处: 生物技术通讯
• 发表日期: 1996年2期
• 关键词: 组织型纤溶酶原激活剂cDNA SR启动子 MT启动子 大T抗原 中国仓鼠卵巢细胞 tissue-type plasminogen activator (t-PA

人组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）cDNA克隆片段。采用两种方式构建成真核表达质粒。第一:切除t-PA3＇端非编码区序列后插入SR启动子和SV₄₀晚期Poly（A）终止信号之间,形成pMGZ6001质粒;第二:将3＇端部分切除并带有Poly（A）加尾信号的t-PA片段插入由金属硫蛋白MT启动子调控的载体中,分别组建成含大T抗原与不含大T抗原的两个表达质粒pMGZ6002和pMGZ6003。这三种质粒用磷酸钙共沉淀法和电穿孔法转染CHO-dhfr细胞,阳性克隆细