【摘 要】
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目的：构建以带自身启动子的蔗糖转化酶基因（suc2）为选择标记的载体,用于外源基因在巴斯德毕赤酵母中的正确分泌表达。方法：根据已发表的蔗糖转化酶基因序列设计并合成1对引物,应
【机 构】
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湖北大学生命科学学院分子微生物与基因工程研究室
【基金项目】
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湖北省自然科学基金项目（2003ABA118）
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目的：构建以带自身启动子的蔗糖转化酶基因（suc2）为选择标记的载体,用于外源基因在巴斯德毕赤酵母中的正确分泌表达。方法：根据已发表的蔗糖转化酶基因序列设计并合成1对引物,应用PCR技术,以啤酒酵母INVSC1总DNA为模板,扩增出包含自身启动子和终止区序列的suc2基因。将该基因与毕赤酵母表达载体pPIC9K连接,构建了以suc2为选择标记的表达载体pPIC12K。将甘露聚糖酶基因man克隆入载体pPIC12K,用PEG/LiCl法转化毕赤酵母GS115菌株。以蔗糖为惟一碳源筛选转化子,利用底物平板检测
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