重组极耐热内切葡聚糖酶Cel12B的诱导条件及酶的纯化

• 作 者: 李相前 邵蔚蓝
• 机 构: 江南大学工业生物技术教育部重点实验室,无锡,214036淮阴工学院,淮安,223001;江南大学工业生物技术教育部重点实验室,无锡,214036;南京师范大学生命科学院,南京,210097
• 出 处: 食品科技
• 发表日期: 2006年10期
• 关键词: 重组菌 诱导 内切葡聚糖酶
• 基金项目: 江苏省教育厅自然科学基金

构建重组菌(JM109/pET-20b-Cel12B)生产极耐热内切葡聚糖酶,研究了不同表达宿主、IPTG诱导时间、IPTG浓度、重组菌生长不同阶段添加IPTG对重组菌生产极耐热内切葡聚糖酶的影响.结果表明:最佳诱导时间是OD值为1.0,IPTG浓度从0.5到3.0对酶活表达影响不大,诱导8h后极耐热内切葡聚糖酶表达量基本不变,优化后重组菌(E.coli BL21-CodonPlus(DE3)-RIL/pET-20b-Cel12B)表达酶活比原来菌株(E.coli JM109(DE3)/pET-20b-Cel12B)提高了53.9%,经过热处理和亲和层析得到电泳纯的蛋白条带.