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［摘 要］ 目的探讨依达拉奉对脑梗死患者的治疗作用及对血清中基质金属蛋白酶_2(MMP_2)和基质金属蛋 白酶_9(MMP_9)的影响 。方法 选择35例正常体检者作为对照组，选择住院诊治的110例急性脑梗 死患者，随机分为两组，常规治疗组40例采用常规治疗，依达拉奉组70例在常规治疗的基础 上加用依达拉奉治疗。两组在治疗前、后行NIHSS评分判定疗效，并应用酶联免疫吸附实验 (ELISA）检测治疗前、后患者血清中MMP_2和MMP_9的表达。 结果 依达拉奉组和常规治疗组治疗后的MMP_2和MMP_9表达均下降，依达 拉奉组更明显。结论 与常规治疗组相比，依达拉奉治疗脑梗死的效果明 显，并能调节血清中MMP_2和MMP_9的表达。
［关键词］ 急性脑梗死；依达拉奉；基质金属蛋白酶_2；基质金属 蛋白酶_9
中图分类号：R743.3 文献标 识码：A 文章编号：1009_816X(2010)06_0440_03
DOI:10.3969/j.issn.1009_816X.2010.06.13
脑梗死是神经内科的常见病，主要治疗方法是溶栓、抗血小板聚集、抗凝、改善微循环和神 经保护等综合治疗。脑缺血后可引发一系列神经生物化学变化从而导致脑损伤，自由基在脑 损伤的发生发展中有重要作用。自由基可激活基质金属蛋白酶，因此基质金属蛋白酶家族 (MMPs)尤其是基质金属蛋白酶_2(MMP_2)和基质金属蛋白酶_9(MMP_9)在其发病中的作用逐渐 引起关注［1，2］。依达拉奉有清除自由基和抑制脂质过氧化、保护血管内皮细胞等作用，可以 改善因 脑缺血及再灌注引起的氧自由基释放造成的脑损伤［3］。本文对急性脑梗死患者应 用依达拉奉进行临床对照研究，并检测治疗前、后血清中MMP_2和MMP_9的表达情况，旨在为 临床合理诊治提供理论支持。
1 资料和方法
1.1 一般资料：选取2008年1月至2010年4月入住我院的发病24小时内的颈内动脉系统急性 脑梗死患者。纳入标准均符合全国第四届脑血管病会议的诊断标准。本组均排除合并内脏重 要器官疾病和恶性肿瘤的患者，排除近3个月应用免疫抑制剂的患者。共观察110例，随机分 为依达拉奉组(70例)和常规治疗组(40例)，其中依达拉奉组男39例，女31例，年龄45～78(6 0.63±11.78)岁；常规治疗组男24例，女16例，年龄48～79(61.50±13.04)岁。同时选 取我院体检中心正常体检者35例作为对照组，其中男19例，女16例，年龄50～76(60.96±9 .23)岁，所有受试者均排除脑出血、恶性肿瘤、炎性血管病、严重心肺肝肾疾病。三组在 性别、年龄、病史等相关因素的比较中，差异无统计学意义。
1.2 治疗方法：常规治疗组应用常规治疗，即脱水降颅压、减轻脑水肿、抗血小板制剂、 脑细胞保护剂（自由基清除剂除外）及对症支持治疗。依达拉奉组在常规治疗基础上，加用 依达拉奉（规格：30mg,厂家：南京先声东元制药有限公司，生产许可证号：国药准字H2005 0280,用法：30mg加入0.9%氯化钠溶液100ml中静脉滴注，2次/日）治疗，时间为2周。
1.3 MMP_2和MMP_9的检测：患者均于发病后24小时内与治疗15天时抽取空腹静脉血，立即 置于-70℃冰箱中待检。酶联免疫吸附实验（ELISA）检测血清中MMP_2和MMP_9的水平。 试剂盒由R&D公司提供。所有步骤均严格按操作说明书进行检测，检测过程中严格质控。
1.4 疗效的判定：采用美国国立卫生研究院卒中量表（national institutes of healthstroke scale，NIHSS）记分法，于发病后24小时内与治疗15天时对患者进行临床神经功能 损害程度评价。
1.5 统计学方法：计量数据均以均数±标准差（x －±s）表示，应用SPSS13.0软件进行分析，组间比较采用t检验，各因素之 间关系采用直线相关分析。组间差别采用t检验和方差分析，变量间的分析采用spearma n相关分析，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 依达拉奉组与常规治疗组治疗后疗效的比较：见表1。常规治疗组和依达拉奉组治疗2 周后NIHSS评分均较治疗前24h内显著降低(P<0.05),而依达拉奉组降低更明显(P<0. 05),表明加用依达拉奉后疗效更加显著。
2.2 各组治疗前、后血清中MMP_2和MMP_9表达的比较：常规治疗组和依达拉奉组患者发病 24h内的MMP_2、MMP_9均较对照明显升高(P<0.05),治疗2周后两组均显著降低(P<0. 05),其中MMP_9降至正常水平(P>0.05),而MMP_2仍高于正常水平(P<0.05)。依达拉 奉组与常规治疗组相比，治疗2周后MMP_2水平降低更显著(P<0.05),而MMP_9水平则无显 著性差异(P>0.05),见表2。
2.3 相关性分析：治疗NIHSS评分与MMP_2、MMP_9的表达呈正相关(r_MMP_2=0.425，P <0.05;r_MMP_9=0.523，P<0.05),MMP_2与MMP_9无相关性(P>0.05).而治疗后三者之 间均无明显相关性(P>0.05)。
3 讨论
自从Serena等提出了脑梗死发病机制的“细胞外基质破坏”学说后，如何维持细胞外基质完 整性，从而有效缓解血管性水肿及神经元缺血坏死已成为近来研究的热点［4］。研 究证实基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)能降解细胞外基质，破坏脑血管的 完整性，从而导致更严重的血脑屏障损伤。脑缺血可诱导MMPs的表达，通过促进细胞外基质 降解和再灌注后血脑屏障开放、脑水肿形成和白细胞浸润，表明MMPs参与急性脑梗死的病理 过程［5］。动物实验已证实，在脑缺血时MMPs水平升高［6］。Horstmann等 ［7］发现急性脑梗死患者MMP_2、MMP_9水平在脑梗死过程中明显增高。Montaner［8］等在39例脑梗死患者的研究中发现MMPs与脑梗死急性期有关，脑梗死后MMP_9水平 增高，且与NIHSS评分和梗死灶体积相关。本文中发现，急性颈内动脉系统脑梗死患者起病2 4h内的NIHSS评分与MMP_2及MMP_9均存在正相关关系（P<0.05），提示MMP_2及MMP_9的 血清浓度可以作为一种评价指标，在评价脑梗死严重程度方面有重要价值。
依达拉奉的主要成分为3_甲基_1_苯基_2_吡唑啉_5_酮，是一种强效的羟自由基(-OH）清除 剂及抗氧化剂，也是一种新型的神经保护剂，其作用机制为［9，10］：(1）能清除 缺血周边和缺血再通部位产生的大量OH，切断连锁反应，减轻自由基对组成细胞磷脂膜的多 聚不饱和脂肪酸的氧化损伤，减轻脑水肿；(2）作为自由基捕获剂，可抑制黄嘌呤化酶和次 黄嘌呤氧化酶的活性刺激前列环素的生成，减少炎症介质白三烯的生成，降低羟白由基的浓 度，减少缺血半暗带发展成梗死的体积，并抑制迟发性的神经元死亡，从而减轻神经功能障 碍；(3）能防止血管内皮细胞损伤，发挥有益的抗缺血作用。Suda等［11］通过对6 例大脑半球广泛梗死的患者进行MRI检查并分析，并对依达拉奉的抗水肿效果进行评估，发 现依达拉奉能补救梗死灶周围的缺血半暗带，明确其是有效的具有细胞保护作用的抗水肿药 物。本文显示治疗前、后依达拉奉组与常规治疗组在疗效上相比具有显著性差异(P<0.0 5),说明依达拉奉作为自由基清除剂，可以更好的保护脑组织，促进神经功能恢复。而MMP_2 及MMP_9在患者发病24小时内均升高，经过2周治疗，常规治疗组和依达拉奉组两者均显著降 低(P<0.05),其中MMP_9降低至正常水平，这也与MMP_9在疾病早期发生增高，发病1周后 降低的研究结果相符和。而依达拉奉组和常规治疗组相比，MMP_2在治疗2周后降低显著(P <0.05),更支持了MMP_2在脑梗死中也起重要作用，依达拉奉对脑梗死的治疗和对脑细胞的 保护可能是通过调节降低MMP_2和MMP_9的水平来发挥作用的。
综上所述，与常规治疗组相比，急性脑梗死患者早期使用自由基清除剂依达拉奉可以显著降 低血清MMP_2和MMP_9的表达，对脑梗死治疗作用明显，可在临床中应用。
参考文献
［1］Kelly PJ, Morrow JD, Ning M, et al. Oxidative stress and matrix me tal loproteinase_9 in acute ischemic strok： the Biomarker Evaluation for Antio xidant Therapies in Stroke (BEAT_Stroke）study［J］． Stroke，2008，39（1）：100 -104.
［2］Gasche Y, Soccal PM, Kanemitsu M, et al． Matrix metal loproteinases and di seases of the central nervous system with a special emphasis on ischemic brain［J］． Front Biosci，2006，11：1289-1301．
［3］Rosell A, Ortega_Aznar A, Alvarez_Sabín J, et al．Increased brain express ion of matrix metal. loproteinase_9 after ischemic and hemorrhagic human stro ke［J］．Stroke，2006，37（6）：1399-1406．
［4］Serena J, Blanco M, Castellanos M, et al．The prediction of m alignant cer ebral infarction by molecular brain barrier disruption markers［J］．Stroke,2005 ，36（9）：1921-1926．
［5］Neumann_Haefelin T, Kastrup A, de Crespigny A, et al．Serial MRI after tra nsient focal cerebral ischemia in rats：dynamics of tissue injury, blood_brain b arrier damage， and edema formation［J］．Stroke，2000，31（8）：1965-1972：disc ussion 1972-1973．
［6］Fatar M, Stroick M, Griebe M, et al． Matrix metalloproteinases in cerebrov ascular diseases［J］. Cerebrovasc Dis,2005，20（3）：141-151．
［7］Horstmann S, Kalb P, Koziol J， et al． Profiles of matrix metal loproteina ses, their inhibitors, and laminin in stroke patients： influence of different t herapies［J］．Stroke，2003，34（9）：2165-2170．
［8］Montaner J, Molina CA, Monasterio J, et al．Matrix metal loproteinase_9 pre treatment level predicts intracranial hemorrhagic complications after thrombolys is in human stroke［J］．Circulation,2003，107（4）：598-603．
［9］Tanaka M. Pharmacological and clinical profile of the free radical scavenge r edaravone as a neuroprotective agent［J］． Nippon Yakurigaku Zasshi，2002，1 19（5）：301-308．
［10］Edaravone Acute Infarction Study Group. Effect of a novel free radical sca venger, edaravone（MCI_186）， on acute brain infarction. Randomized, placebo_co ntrolled， double_blind study at multicenters［A］．Cerebrovasc Dis，2003，15（3 ）：222-229.
［11］Suda S, Igarashi H, Arai Y, et al． Effect of edaravone, a free radical sc avenger, on ischemic cerebral edema assessed by magnetic resonance imaging［J］ ． Neurol Med Chir (Tokyo），2007，47（5）：197-202．
［关键词］ 急性脑梗死；依达拉奉；基质金属蛋白酶_2；基质金属 蛋白酶_9
中图分类号：R743.3 文献标 识码：A 文章编号：1009_816X(2010)06_0440_03
DOI:10.3969/j.issn.1009_816X.2010.06.13
脑梗死是神经内科的常见病，主要治疗方法是溶栓、抗血小板聚集、抗凝、改善微循环和神 经保护等综合治疗。脑缺血后可引发一系列神经生物化学变化从而导致脑损伤，自由基在脑 损伤的发生发展中有重要作用。自由基可激活基质金属蛋白酶，因此基质金属蛋白酶家族 (MMPs)尤其是基质金属蛋白酶_2(MMP_2)和基质金属蛋白酶_9(MMP_9)在其发病中的作用逐渐 引起关注［1，2］。依达拉奉有清除自由基和抑制脂质过氧化、保护血管内皮细胞等作用，可以 改善因 脑缺血及再灌注引起的氧自由基释放造成的脑损伤［3］。本文对急性脑梗死患者应 用依达拉奉进行临床对照研究，并检测治疗前、后血清中MMP_2和MMP_9的表达情况，旨在为 临床合理诊治提供理论支持。
1 资料和方法
1.1 一般资料：选取2008年1月至2010年4月入住我院的发病24小时内的颈内动脉系统急性 脑梗死患者。纳入标准均符合全国第四届脑血管病会议的诊断标准。本组均排除合并内脏重 要器官疾病和恶性肿瘤的患者，排除近3个月应用免疫抑制剂的患者。共观察110例，随机分 为依达拉奉组(70例)和常规治疗组(40例)，其中依达拉奉组男39例，女31例，年龄45～78(6 0.63±11.78)岁；常规治疗组男24例，女16例，年龄48～79(61.50±13.04)岁。同时选 取我院体检中心正常体检者35例作为对照组，其中男19例，女16例，年龄50～76(60.96±9 .23)岁，所有受试者均排除脑出血、恶性肿瘤、炎性血管病、严重心肺肝肾疾病。三组在 性别、年龄、病史等相关因素的比较中，差异无统计学意义。
1.2 治疗方法：常规治疗组应用常规治疗，即脱水降颅压、减轻脑水肿、抗血小板制剂、 脑细胞保护剂（自由基清除剂除外）及对症支持治疗。依达拉奉组在常规治疗基础上，加用 依达拉奉（规格：30mg,厂家：南京先声东元制药有限公司，生产许可证号：国药准字H2005 0280,用法：30mg加入0.9%氯化钠溶液100ml中静脉滴注，2次/日）治疗，时间为2周。
1.3 MMP_2和MMP_9的检测：患者均于发病后24小时内与治疗15天时抽取空腹静脉血，立即 置于-70℃冰箱中待检。酶联免疫吸附实验（ELISA）检测血清中MMP_2和MMP_9的水平。 试剂盒由R&D公司提供。所有步骤均严格按操作说明书进行检测，检测过程中严格质控。
1.4 疗效的判定：采用美国国立卫生研究院卒中量表（national institutes of healthstroke scale，NIHSS）记分法，于发病后24小时内与治疗15天时对患者进行临床神经功能 损害程度评价。
1.5 统计学方法：计量数据均以均数±标准差（x －±s）表示，应用SPSS13.0软件进行分析，组间比较采用t检验，各因素之 间关系采用直线相关分析。组间差别采用t检验和方差分析，变量间的分析采用spearma n相关分析，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 依达拉奉组与常规治疗组治疗后疗效的比较：见表1。常规治疗组和依达拉奉组治疗2 周后NIHSS评分均较治疗前24h内显著降低(P<0.05),而依达拉奉组降低更明显(P<0. 05),表明加用依达拉奉后疗效更加显著。
2.2 各组治疗前、后血清中MMP_2和MMP_9表达的比较：常规治疗组和依达拉奉组患者发病 24h内的MMP_2、MMP_9均较对照明显升高(P<0.05),治疗2周后两组均显著降低(P<0. 05),其中MMP_9降至正常水平(P>0.05),而MMP_2仍高于正常水平(P<0.05)。依达拉 奉组与常规治疗组相比，治疗2周后MMP_2水平降低更显著(P<0.05),而MMP_9水平则无显 著性差异(P>0.05),见表2。
2.3 相关性分析：治疗NIHSS评分与MMP_2、MMP_9的表达呈正相关(r_MMP_2=0.425，P <0.05;r_MMP_9=0.523，P<0.05),MMP_2与MMP_9无相关性(P>0.05).而治疗后三者之 间均无明显相关性(P>0.05)。
3 讨论
自从Serena等提出了脑梗死发病机制的“细胞外基质破坏”学说后，如何维持细胞外基质完 整性，从而有效缓解血管性水肿及神经元缺血坏死已成为近来研究的热点［4］。研 究证实基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)能降解细胞外基质，破坏脑血管的 完整性，从而导致更严重的血脑屏障损伤。脑缺血可诱导MMPs的表达，通过促进细胞外基质 降解和再灌注后血脑屏障开放、脑水肿形成和白细胞浸润，表明MMPs参与急性脑梗死的病理 过程［5］。动物实验已证实，在脑缺血时MMPs水平升高［6］。Horstmann等 ［7］发现急性脑梗死患者MMP_2、MMP_9水平在脑梗死过程中明显增高。Montaner［8］等在39例脑梗死患者的研究中发现MMPs与脑梗死急性期有关，脑梗死后MMP_9水平 增高，且与NIHSS评分和梗死灶体积相关。本文中发现，急性颈内动脉系统脑梗死患者起病2 4h内的NIHSS评分与MMP_2及MMP_9均存在正相关关系（P<0.05），提示MMP_2及MMP_9的 血清浓度可以作为一种评价指标，在评价脑梗死严重程度方面有重要价值。
依达拉奉的主要成分为3_甲基_1_苯基_2_吡唑啉_5_酮，是一种强效的羟自由基(-OH）清除 剂及抗氧化剂，也是一种新型的神经保护剂，其作用机制为［9，10］：(1）能清除 缺血周边和缺血再通部位产生的大量OH，切断连锁反应，减轻自由基对组成细胞磷脂膜的多 聚不饱和脂肪酸的氧化损伤，减轻脑水肿；(2）作为自由基捕获剂，可抑制黄嘌呤化酶和次 黄嘌呤氧化酶的活性刺激前列环素的生成，减少炎症介质白三烯的生成，降低羟白由基的浓 度，减少缺血半暗带发展成梗死的体积，并抑制迟发性的神经元死亡，从而减轻神经功能障 碍；(3）能防止血管内皮细胞损伤，发挥有益的抗缺血作用。Suda等［11］通过对6 例大脑半球广泛梗死的患者进行MRI检查并分析，并对依达拉奉的抗水肿效果进行评估，发 现依达拉奉能补救梗死灶周围的缺血半暗带，明确其是有效的具有细胞保护作用的抗水肿药 物。本文显示治疗前、后依达拉奉组与常规治疗组在疗效上相比具有显著性差异(P<0.0 5),说明依达拉奉作为自由基清除剂，可以更好的保护脑组织，促进神经功能恢复。而MMP_2 及MMP_9在患者发病24小时内均升高，经过2周治疗，常规治疗组和依达拉奉组两者均显著降 低(P<0.05),其中MMP_9降低至正常水平，这也与MMP_9在疾病早期发生增高，发病1周后 降低的研究结果相符和。而依达拉奉组和常规治疗组相比，MMP_2在治疗2周后降低显著(P <0.05),更支持了MMP_2在脑梗死中也起重要作用，依达拉奉对脑梗死的治疗和对脑细胞的 保护可能是通过调节降低MMP_2和MMP_9的水平来发挥作用的。
综上所述，与常规治疗组相比，急性脑梗死患者早期使用自由基清除剂依达拉奉可以显著降 低血清MMP_2和MMP_9的表达，对脑梗死治疗作用明显，可在临床中应用。
参考文献
［1］Kelly PJ, Morrow JD, Ning M, et al. Oxidative stress and matrix me tal loproteinase_9 in acute ischemic strok： the Biomarker Evaluation for Antio xidant Therapies in Stroke (BEAT_Stroke）study［J］． Stroke，2008，39（1）：100 -104.
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［3］Rosell A, Ortega_Aznar A, Alvarez_Sabín J, et al．Increased brain express ion of matrix metal. loproteinase_9 after ischemic and hemorrhagic human stro ke［J］．Stroke，2006，37（6）：1399-1406．
［4］Serena J, Blanco M, Castellanos M, et al．The prediction of m alignant cer ebral infarction by molecular brain barrier disruption markers［J］．Stroke,2005 ，36（9）：1921-1926．
［5］Neumann_Haefelin T, Kastrup A, de Crespigny A, et al．Serial MRI after tra nsient focal cerebral ischemia in rats：dynamics of tissue injury, blood_brain b arrier damage， and edema formation［J］．Stroke，2000，31（8）：1965-1972：disc ussion 1972-1973．
［6］Fatar M, Stroick M, Griebe M, et al． Matrix metalloproteinases in cerebrov ascular diseases［J］. Cerebrovasc Dis,2005，20（3）：141-151．
［7］Horstmann S, Kalb P, Koziol J， et al． Profiles of matrix metal loproteina ses, their inhibitors, and laminin in stroke patients： influence of different t herapies［J］．Stroke，2003，34（9）：2165-2170．
［8］Montaner J, Molina CA, Monasterio J, et al．Matrix metal loproteinase_9 pre treatment level predicts intracranial hemorrhagic complications after thrombolys is in human stroke［J］．Circulation,2003，107（4）：598-603．
［9］Tanaka M. Pharmacological and clinical profile of the free radical scavenge r edaravone as a neuroprotective agent［J］． Nippon Yakurigaku Zasshi，2002，1 19（5）：301-308．
［10］Edaravone Acute Infarction Study Group. Effect of a novel free radical sca venger, edaravone（MCI_186）， on acute brain infarction. Randomized, placebo_co ntrolled， double_blind study at multicenters［A］．Cerebrovasc Dis，2003，15（3 ）：222-229.
［11］Suda S, Igarashi H, Arai Y, et al． Effect of edaravone, a free radical sc avenger, on ischemic cerebral edema assessed by magnetic resonance imaging［J］ ． Neurol Med Chir (Tokyo），2007，47（5）：197-202．