18型人乳头瘤病毒E6蛋白截短体(HPV18E6*)的基因克隆与表达

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目的构建HPV18E6*原核重组表达质粒,并优化其蛋白表达条件。方法以人宫颈癌HeLa细胞cDNA为模版,PCR扩增HPV18E6*基因,构建重组表达载体HPV18E6*-pET28a,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达重组蛋白,并优化其表达条件,SDS.PAGE检测重组蛋白表达状况。结果成功构建了重组表达载体;37℃表达,HPV18E6*以不溶包涵体为主,表达量占菌体总蛋白的20%左右;15℃主要为可溶形式;包涵体变复性获得纯蛋白。结论HPV18E6*蛋白的高效表达为研究其蛋白作用机制及为研究预防和
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