【摘 要】
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目的 观察滋肾活血法联合低分子肝素对复发性流产小鼠流产率及蜕膜中血管内皮生长因子/血管内皮生长因子受体2/磷酸化的细胞外调节蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶（VEGF/VEGFR-2/p-ERK/ERK）信号通路的影响。方法 68只未孕CBA/J雌鼠，26只DBA/2雄鼠，8只BALB/c雄鼠，按雌∶雄=2∶1，建立CBA/J×DBA/2习惯性流产模型小鼠50只，随机数字法分为模型组（蒸馏水）、LMW
【基金项目】
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浙江省“十三五”中医药重点专科建设项目（No.浙卫办[2019]1号）； 宁波市科技计划项目（No.2019A610358）；
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目的 观察滋肾活血法联合低分子肝素对复发性流产小鼠流产率及蜕膜中血管内皮生长因子/血管内皮生长因子受体2/磷酸化的细胞外调节蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶（VEGF/VEGFR-2/p-ERK/ERK）信号通路的影响。方法 68只未孕CBA/J雌鼠，26只DBA/2雄鼠，8只BALB/c雄鼠，按雌∶雄=2∶1，建立CBA/J×DBA/2习惯性流产模型小鼠50只，随机数字法分为模型组（蒸馏水）、LMWH组（1000U/kg）、滋肾活血方低剂量（3.9g/kg）+LMWH（1000U/kg）组、滋肾活血方中剂量（11.7g/kg）+LMWH（1000U/kg）组、滋肾活血方高剂量（35.1g/kg）+LMWH（1000U/kg）组，每组10只；建立CBA/J×BALB/c正常妊娠模型小鼠10只作为正常对照组（蒸馏水）。按照人鼠体表面积换算每日滋肾活血方灌胃药量和LMWH注射量，给药干预2周。计算各组小鼠胚胎丢失率；免疫组化法测定小鼠蜕膜中VEGF蛋白的表达；蛋白质印迹法（Western blot）测定小鼠蜕膜中VEGF、VEGFR-2、p-ERK、ERK表达。结果 与正常对照组比较，模型组胚胎丢失率上升（38.38%比7.29%,P<0.05），免疫组化VEGF蛋白平均光密度值降低[（0.22±0.07）比（0.23±0.01）,P<0.01],Western blot结果显示，VEGF、VEGFR-2蛋白表达下降[VEGF:（2.01±0.08）比（2.90±0.06）;VEGFR-2:（2.62±0.01）比（3.15±0.08）,P均<0.05]。与模型组比较，LMWH组、滋肾活血方低剂量+LMWH组、滋肾活血方中剂量+LMWH组和滋肾活血方高剂量+LMWH组胚胎丢失率下降（23.76%、16.83%、12.75%、10.10%比38.38%,P均<0.05），免疫组化结果显示，上述四组VEGF蛋白平均光密度值上升[（0.24±0.04）、（0.29±0.02）、（0.32±0.06）、（0.33±0.10）比（0.22±0.07）,P均<0.05],Western blot结果显示，上述四组的VEGF、VEGFR-2、p-ERK、ERK蛋白表达上升[VEGF:（3.13±0.09）、（2.93±0.73）、（3.31±0.18）、（3.38±0.15）比（2.01±0.08）;VEGFR-2:（3.19±0.03）、（3.53±0.10）、（3.77±0.12）、（3.83±0.09）比（2.62±0.01）;p-ERK:（1.57±0.35）、（1.79±0.06）、（1.73±0.07）、（1.75±0.06）比（1.39±0.04）;ERK:（3.82±0.08）、（4.22±0.09）、（4.24±0.04）、（4.19±0.27）比（3.42±0.14）,P均0.05），滋肾活血方中剂量+LMWH组、滋肾活血方高剂量+LMWH组胚胎丢失率降低更显著（P均<0.05）；免疫组化结果显示，VEGF蛋白平均光密度值在滋肾活血方低剂量+LMWH组、滋肾活血方中剂量+LMWH组、滋肾活血方高剂量+LMWH组上升（P均<0.05）;Western blot结果显示，上述三组VEGFR-2、p-ERK、ERK蛋白表达上升（P均0.05）。结论 滋肾活血法联合LMWH能够改善复发性流产小鼠妊娠结局，其机制可能与激活VEGF/VEGFR-2/p-ERK/ERK信号通路有关。
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