钙离子对HaCaT细胞体外增殖及白细胞介素6表达、分泌的影响

• 作 者: 孙海严 楚瑞琦
• 机 构: 河北大学附属医院皮肤科
• 出 处: 中国皮肤性病学杂志
• 发表日期: 2016年12期
• 关键词: 银屑病 钙离子 HaCaT细胞 角质形成细胞 白细胞介素6

目的探讨不同钙离子(Ca²⁺)浓度对人永生化角质形成细胞株HaCaT（human immortal keratinocyte colony HaCaT cells）细胞体外增殖及表达、分泌白细胞介素6（IL-6）的影响。方法用加入不同浓度Ca²⁺的洛斯维（roswell park memorial institute,RPMI）1640培养液(Ca²⁺终浓度分别为0.3mmol/L,0.5mmol/L,1mmol/L)与RPMI1640培养液（对照组）分别培养HaCaT细胞。培养HaCaT细胞24h,48h时,MTT法检测细胞增殖情况;q PCR法检测IL-6 mRNA的表达;酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞上清液中IL-6的分泌量;免疫细胞化学法观察细胞中IL-6的表达。结果 MTT结果显示,在设定浓度下Ca²⁺对HaCaT细胞的增殖作用随其浓度增加而增高;与对照组相比,各浓度组培养24h,48h时,HaCaT细胞增殖率分别为9.65%±0.57%,29.47%±0.73%,52.18%±1.13%（P均<0.01）;10.23%±0.51%,34.17%±1.14%,57.96%±0.21%（P均<0.01）。各浓度组培养HaCaT细胞24h,48h时,IL-6 mRNA表达量随Ca²⁺浓度增加而升高（P<0.01）;IL-6蛋白分泌量随Ca²⁺浓度增加而升高（P<0.01）;免疫细胞化学结果显示,IL-6平均光密度随Ca²⁺浓度增加而升高（P<0.01）。结论在设定浓度下,Ca²⁺可促进HaCaT细胞的体外增殖,并可在mRNA和蛋白水平促进IL-6的表达和分泌,这可能是银屑病皮损处钙浓度增高导致角质形成细胞增殖和炎症反应加重的原因。