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毛丝鼠配种应以满8月龄为好。成年母鼠每35～55天发情排卵1次,每年可繁殖两窝以上。母鼠发情初期阴道膜变薄呈透明状,进而穿孔,阴道开口,外阴部略有红肿,此时是配种的最佳时机。将其取出放入公鼠笼内,若公母鼠互相蹭鼻爬跨,则可顺利完成交配。交配后母鼠阴部很快形成一种半透明的阴道栓,下一次交配时阴道栓排出体外。阴道栓是母鼠受配的重要标志,可按见栓日期计算预产期。