应用限制性显示技术制备HCV cDNA诊断基因芯片的初步研究

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制备丙型肝炎病毒(HCV)检测芯片并进行验证、初步检测质量评价.采用限制性显示(Restriction display, RD)技术制备芯片探针,从载体pCV-J4L6S中切出HCV全长cDNA,Sau3AⅠ酶消化,所得的限制性片段进行RD-PCR扩增,经聚丙烯酰胺电泳(PAGE)结合银染法进行分离.切胶回收后作3次PCR,得到较纯净的HCV cDNA限制性片段.扩增后的产物克隆至pMD18-T载体进行快速鉴定.将筛选出的限制性片段打印在氨基修饰的玻片上制备成检测芯片进行杂交验证分析,对芯片检测进行优化、
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