【摘 要】
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目的 了解核糖核酸酶RnaseⅢ rncS基因缺失对单核细胞增生李斯特菌(LM)环境应激和生物被膜形成的影响. 方法 以LM SB5强毒株为对象,利用温度敏感型穿梭质粒pKSV7,通过基因重
【机 构】
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石河子大学动物科技学院动物疾病防控兵团重点实验室,新疆石河子,832003;乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心;新疆畜牧科学院兽医研究所;中国农业科学院兰州兽医研究所
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目的 了解核糖核酸酶RnaseⅢ rncS基因缺失对单核细胞增生李斯特菌(LM)环境应激和生物被膜形成的影响. 方法 以LM SB5强毒株为对象,利用温度敏感型穿梭质粒pKSV7,通过基因重叠延伸PCR (SOE-PCR)和同源重组技术构建LM-△rncS基因缺失突变株,检测其在不同温度、pH、高盐、乙醇、H2O2胁迫环境下的适应能力,通过结晶紫染色法检测生物被膜的形成能力. 结果 与LM-SB5株相比,构建的LM-△rncS在37℃、pH 4及pH 7的环境适应能力无显著变化(P＞0.05),而在30℃、42℃、pH 9、5％NaCl、3.8％乙醇、0.1％ H2O2的应激环境下其适应能力及生物被膜的形成能力显著降低(P＜0.05),提示Rnase Ⅲ RncS参与了LM对低温、高温、碱、高盐、乙醇及H2O2胁迫环境的适应过程及生物被膜形成的调控. 结论 构建的LM-△rncS基因缺失突变株,在不同应激环境下的适应能力及生物被膜形成能力均显著降低,为RnaseⅢ RncS参与LM ncRNA调控环境应激的分子机制研究奠定了基础.
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