【摘 要】
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【目的】构建绵羊肺炎支原体（MO）p74基因重组单核细胞增生李斯特菌（LM）并分析其免疫原性,为研发MO重组活疫苗奠定基础。【方法】采用PCR方法从LM-SB5株基因组中扩增出rli60基因的
【机 构】
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石河子大学动物科技学院,阿克苏地区动物疫病控制诊断中心,中国农业科学院兰州兽医研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（31360596）, 国家国际科技合作专项（2014DFR31310）
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【目的】构建绵羊肺炎支原体（MO）p74基因重组单核细胞增生李斯特菌（LM）并分析其免疫原性,为研发MO重组活疫苗奠定基础。【方法】采用PCR方法从LM-SB5株基因组中扩增出rli60基因的上、下游同源片段a和b,从质粒pET-32a（＋）-p74中扩增出MOp74目的基因片段,利用重叠延伸PCR方法（SOE-PCR）将扩增的3个片段融合成ap74b基因片段,克隆入pMD19-T载体中进行测序鉴定。将ap74b片段从pMD19-T载体上切下亚克隆入pKSV7穿梭载体,构建pKSV7-ap74b重组穿梭质
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