腐生葡萄球菌脂肪酶3制备及酶活性研究

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克隆得到腐生葡萄球菌M36的脂肪酶3编码基因,构建了Pet28-Ss-Lip3表达质粒,在大肠菌株中获得腐生葡萄球菌脂肪酶3的高效上清表达,应用Ni(2+)-NTA亲和层析柱获得了纯度约90%的重组脂肪酶,分子筛检测发现其在溶液中主要以单体形式存在。酶活性分析纯化后的脂肪酶最适宜的反应pH值为7.0,温度为40℃。结果表明,腐生葡萄球菌脂肪酶3的碱性和温度耐受性较好,有望通过定点突变获得更好适应性的脂肪酶。
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