【摘 要】
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目的:比较改良酚-氯仿抽提法、盐析法、试剂盒法从人全血中提取基因组DNA的效果,以期建立一种快速、经济的提取高质量基因组DNA的方法。方法:分别用上述三种方法从人全血中提
【机 构】
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首都医科大学神经生物学系,北京市脑重大疾病重点实验室,北京市重大脑疾病研究院; 首都医科大学医学实验与测试中心;
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划项目(973项目)(2010CB912003);国家自然科学基金项目(31171032);北京市属高等学校人才强教深化高层次人才计划项目(PHR20100510)
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目的:比较改良酚-氯仿抽提法、盐析法、试剂盒法从人全血中提取基因组DNA的效果,以期建立一种快速、经济的提取高质量基因组DNA的方法。方法:分别用上述三种方法从人全血中提取基因组DNA,通过紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳、聚合酶链式反应(PCR)、限制性内切酶酶切检测提取的基因组DNA的产量、纯度和质量。结果:改良酚-氯仿抽提法与试剂盒法提取的基因组DNA相比,DNA的产量有统计学差异,DNA的纯度无统计学差异,但试剂盒法提取的基因组DNA有较明显的降解现象;盐析法与改良酚-氯仿抽提法、试剂盒法相比,基因组DNA的产量和纯度都存在统计学差异,并且基因组DNA聚合酶链式反应(PCR)扩增的稳定性也明显劣于另外两种方法;三种方法提取基因组DNA均能进行限制性内切核酸消化。结论:改良酚-氯仿抽提取法是一种经济、快速、高效、稳定提取人全血基因组DNA的方法,适用于批量临床标本处理。
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