晚期糖基化终末产物受体不同突变体真核表达载体的构建和表达

• 作 者: 程蔚蔚 李煜生 龚小卫 赵琳琳 王继刚 邓鹏 姜勇
• 机 构: 南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室
• 出 处: 南方医科大学学报
• 发表日期: 2008年10期
• 关键词: 晚期糖基化终末产物受体 定点突变 载体构建 基因表达 receptor advanced glycation end products site-direc
• 基金项目: 教育部创新团队项目（IRT0731）,国家自然科学基金委-广东省人民政府自然科学联名基金重点项目（U0632004）,广东省科技计划项目（A1090202）和广东省自然科学基金重点项目（13058）

目的构建带HA标签的晚期糖基化终末产物受体（RAGE）不同突变体的真核细胞表达载体。方法采用定点突变技术将亚克隆在载体pcDNA3-HA上的野生型RAGE构建成不同突变体pcDNA3-HA—RAGE（S391A）、pcDNA3-HA-RAGE（S399A）、pcDNA3-HA-RAGE（S400A）、pcDNA3-HA-RAGE（T401A），经测序鉴定正确后转染HEK293细胞，利用Western blotting检测各突变体的表达。结果RAGE不同突变体经测序鉴定正确无误后，在HEK293细胞中得到高