高糖对牙龈卟啉单胞菌脂多糖刺激人成纤维细胞分泌炎症因子的影响

• 作 者: 蒋少云 魏丛丛 薛栋 邓嘉胤 连琪 董允允
• 机 构: 300070天津医科大学口腔医院牙周科,山东省聊城市人民医院口腔牙周科,300070天津医科大学口腔医院牙周科,300070天津医科大学口腔医院牙周科,300070天津医科大学口腔医院牙周科,3000
• 出 处: 中华口腔医学杂志
• 发表日期: 2014年49期
• 关键词: Porphyromonas gingivalis Lipopolysaccharides Periodontitis Tumor necrosis factor

目的 探讨高浓度葡萄糖对牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)脂多糖刺激人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGF)分泌炎症细胞因子的影响及作用机制,进一步探讨糖尿病与牙周炎的相互关系.方法 组织块法培养HGF,细胞处理分为以下4组:A组:低糖(5.5 mmol/L葡萄糖)+1 mg/L Pg脂多糖刺激组;B组:低糖+10 mg/L Pg脂多糖刺激组;C组:高糖(25 mmol/L葡萄糖)+1 mg/L Pg脂多糖刺激组;D组:高糖+10 mg/L Pg脂多糖刺激组.采用酶联免疫法检测4组HGF细胞6、12h后分泌肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的变化,实时定量PCR检测Toll样受体(toll-like receptor,TLR)2和TLR4在HGF中的表达.在高糖+10 mg/L Pg脂多糖组采用抗TLR2、抗TLR4单克隆抗体预先处理HGF,检测HGF中12h的TNF-α、IL-1β水平,以高糖+10 mg/L Pg脂多糖刺激组为对照组,并进行统计学分析.结果 相同质量浓度的Pg脂多糖刺激HGF 6、12h后高糖条件(C组、D组)下TNF-α及IL-1β分泌及TLR2 mRNA的表达均较低糖条件下(A组、B组)显著升高(P值均＜0.01),TLR4 mRNA的表达C组与A组相比表达升高,但差异无统计学意义(P＞0.05);D组显著高于B组(P＜0.01).高糖+10 mg/L Pg脂多糖刺激组中分别阻断TLR2、4后,TNF-α的分泌量分别为(297.16± 11.49)、(390.01±12.81) ng/L,均显著低于对照组[(459.80±8.04) ng/L](F=166.02,P＜0.01),IL-1β的分泌量分别为(49.90±4.08)、(99.35±5.01) ng/L,亦均显著低于对照组[(147.37±9.87) ng/L](F=153.51,P＜0.000 1).结论 高糖可明显促进Pg脂多糖刺激HGF后炎症细胞因子的分泌,其作用可能通过调节HGF表面TLR2和TLR4的表达来实现,在一定程度上证实糖尿病患者血糖升高可加重牙周炎症。