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登革热病毒( DENV)严重威胁全球人类健康,而且这种威胁在不断加剧,DENV特异性CD8+ T细胞在病毒感染中的确切作用还未搞清。此研究中作者将SYFPEITHI算法用于Ⅰ型登革热病毒( DENV-1)潜在表位氨基酸序列的筛选。合成了在数百种DENV-1病毒株中保守的7个HLA-A 1101限制性和5个HLA-A 2402限制性推定的表位。用竞争性肽结合试验对这些表位候选物与相应HLA分子的结合亲和力进行评价。 HLA-A 1101转基因小鼠, HLA-A 2402转基因小鼠及感染DENV-1患者的外周血单核细胞( PBMCs)被用于检测多肽的免疫原性及特异性。竞争性肽结合检测法算出的抑制百分比(PI)显示,6种肽(E39-47PTLDIELLK、S5(505-513) GVEGEGLHK、NS2 b (15-23) SILLSSLLK、NS5(561-569)ALLATSIFK、NS3(99-107)AVEPGPNPK和NS4b(159-167) VVYDAKFEK)与HLA-A1101分子有高度的亲和力,5种肽( NS3472-480QYIYMGQPL、 NS4a40-48AYRHAMEEL、 NS5(880-888) DYMTSMKRF、NS3(548-556) SYKVA-SEGF 和 NS3(22-30) IYRILQRGL )与 HLA-A2402分子有高度的亲和力。酶联免疫斑点法( ELISPOT)结果显示这些高亲和力的多肽被DENV-1感染的转基因小鼠的脾细胞所识别,并且被这些多肽免疫的转基因小鼠显示了高水平的肽特异性IFN-γ分泌细胞。另外,肽脉冲过的脾细胞及DENV-1感染的脾单核细胞都被这些肽特异性细胞毒性淋巴细胞有效杀死。10种高亲和力的多肽中除NS2 b (15-23)之外,俱被DENV-1感染病人的PBMCs所识别。这些表位的鉴定对理解DENV特异性CD8+ T细胞的功能有所助益。