牛皮肤成纤维细胞的体外培养与冻存

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利用牛皮肤组织块直接培养法,得到牛皮肤细胞的原代培养物,再用酶消化法和反复贴壁法处理,能够纯化成纤维细胞.成纤维细胞的冻存是通过选用6种分别含有二甲基亚砜(DMSO)、甘油(GL)及乙二醇(EG)的保护液;以相同的冻前处理方法,对牛皮肤成纤维细胞进行缓慢冷冻,冰箱预冷平衡1~2h,逐步投入液氮(-196℃)中保存,再经37℃水浴解冻,Hanks液脱保护剂,以贴壁率评价冻存效果.结果表明,20%DMSO保护液对牛皮肤成纤维细胞表现出较好且稳定的冷冻保护效果,其平均贴壁率达87.9%.
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