【摘 要】
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目的克隆人转化生长因子(TGFβ 1)基因并且在大肠杆菌中表达.方法从人的血小板中抽提总RNA,经逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)得到全长TGFβ 1 cDNA,将其克隆于表达质粒pBLMVL2中
【机 构】
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上海第二医科大学生化教研室分子生物学实验室
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目的克隆人转化生长因子(TGFβ 1)基因并且在大肠杆菌中表达.方法从人的血小板中抽提总RNA,经逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)得到全长TGFβ 1 cDNA,将其克隆于表达质粒pBLMVL2中,构建了在PL启动子控制的含有T GFβ 1 cDNA重组子,转化到大肠杆菌RR1菌株中,进行温敏诱导表达.结果表达产物经SDS-PAGE电泳染色后,显示其相对分子质量为12.5×103,计算机灰度扫描分析,表达产物约占全菌蛋白的20%左右,Western-blot分析证实,表达产物为TGFβ 1,细胞实验显示其具有一定的生物活性.结论在大肠杆菌中表达出具有活性的人TGFβ 1.这为我们下一步研究其功能和临床应用打下了基础.
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