【摘 要】
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以产弹性蛋白酶的铜绿假单胞菌基因组DNA为模板，经PCR扩增得到约1．5kh的弹性蛋白酶基因，克隆到质粒pET28a，连同其上游的6×His序列转移到pBacPAK8构建成pBacPAK8-His-Ela转移
【基金项目】
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国家教委博士点基金项目(编号20050625009)
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以产弹性蛋白酶的铜绿假单胞菌基因组DNA为模板，经PCR扩增得到约1．5kh的弹性蛋白酶基因，克隆到质粒pET28a，连同其上游的6×His序列转移到pBacPAK8构建成pBacPAK8-His-Ela转移载体。采用Lipofectin法，将载体pBacPAK8-His-Ela和亲本病毒BacPAK6共转染Sf21细胞，经空斑纯化分离得到重组病毒BacPAK6-Ela。通过双酶切及单酶切鉴定证实弹性蛋白酶基因已插入到病毒基因组的多角体启动子下游，SDS-PAGE检测到在昆虫细胞中表达约34kD
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